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人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)ELISA试剂盒使用说明书

2017-11-30 16:48重庆新闻网编辑:admin人气:


  本试剂盒仅供研究利用。检测范畴: 96T50μg/L -1200μg/L利用目标:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)含量。尝试道理本试剂盒使用双抗体夹心法测定标本中人半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)程度。用纯化的人半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)抗体包被微孔板,澳门新葡京娱乐场制成固相抗体,往包被单抗的微孔中顺次插手半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC),再取HRP标识表记标帜的半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)抗体连系,构成抗体-抗原-酶标抗体复合物,颠末完全洗涤后加底物TMB显色。TMB正在HRP酶的催化下转化成蓝色,并正在酸的感化下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)呈正相关。用酶标仪正在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过尺度曲线计较样品中人半胱氨酸卵白酶抑止剂C(CysC)浓度。 试剂盒构成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8尺度品(2400μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9尺度品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10仿单1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行尝试。若不克不及马长进行试验,可将标本放于-20℃保留,但应避免频频冻融2.不克不及检测含NaN3的样品,因NaN3抑止辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操做步调1.尺度品的稀释:本试剂盒供给原倍尺度品一支,用户可按照下列图表正在小试管中进行稀释。1200μg/L5号尺度品150μl的原倍尺度品插手150μl尺度品稀释液600μg/L4号尺度品150μl的5号尺度品插手150μl尺度品稀释液300μg/L3号尺度品150μl的4号尺度品插手150μl尺度品稀释液150μg/L2号尺度品150μl的3号尺度品插手150μl尺度品稀释液75μg/L1号尺度品150μl的2号尺度品插手150μl尺度品稀释液2.加样:别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操做不异)、尺度孔、待测样品孔。正在酶标包被板上尺度品精确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,悄悄晃悠混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如斯反复5次,拍干。6.加酶:每孔插手酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操做同3。8.洗涤:操做同5。9.显色:每孔先插手显色剂A50μl,再插手显色剂B50μl,悄悄震动混匀,37℃避鲜明色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反映(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应正在加终止液后15分钟以内进行。

(来源:未知)

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